雜交瘤細(xì)胞；GPC3-7C8說明書

本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)雜交瘤細(xì)胞；GPC3-7C8說明書說明書！

細(xì)胞名稱 雜交瘤細(xì)胞；GPC3-7C8說明書
形態(tài)特性 母細(xì)胞樣

生長特性 半貼壁生長

特征特性 該細(xì)胞屬保藏，其特征特性尚未公開。

培養(yǎng)條件 RPMI 640 (w/o Hepes) 0%FBS

傳代方法 :3傳代，3-4天傳次

傳代情況 C5

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測(cè) 陰性

STR

同工酶

染色體?

主要功能：
（）雜交瘤細(xì)胞；GPC3-7C8說明書血管平滑肌細(xì)胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
（2）表達(dá)鈣通道及ICAM-和VCAM-，參與血管壁的炎癥反應(yīng)。
（3）與血管疾病的進(jìn)展和穩(wěn)定有關(guān)。
 生理變化：
（）主動(dòng)脈硬化。
（2）主動(dòng)脈瘤
（3）主動(dòng)脈鈣化。
基本特性：
（）雜交瘤細(xì)胞；GPC3-7C8說明書組織來源于正常大鼠大動(dòng)脈組織。
（2）鑒定：肌動(dòng)蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
（3）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（4）每凍存管細(xì)胞數(shù)：>5×05 cells/ml。
（5）肌動(dòng)蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗(yàn)證。
（6）不含有HIV-、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

運(yùn)輸和保存：
雜交瘤細(xì)胞；GPC3-7C8說明書視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
)mL凍存細(xì)胞懸液裝于.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存?zhèn)€月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
具體操作：
.預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱。
2.用75％酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺(tái)和雙手。
3.正確擺放使用的器械：保證足夠的*作空間，不僅便于*作而且可減少污染。
4.點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太小。
5.準(zhǔn)備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶，放入微波爐內(nèi)高火，8分鐘再次消毒。
6.取出預(yù)熱好的培養(yǎng)用液：大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞取出已經(jīng)預(yù)熱好的培養(yǎng)用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺(tái)內(nèi)。
7.從培養(yǎng)箱內(nèi)取出細(xì)胞：注意取出細(xì)胞時(shí)要旋緊瓶蓋，用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺(tái)面，再在鏡下觀察細(xì)胞。
8.打開瓶口：將各瓶口一一打開，同時(shí)要在酒精燈上燒口消毒。?

莫諾甙 CAS 25406-64-8 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥97%；20mg/vial

五味子醇甲 CAS 7432-28-2 訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

5-甲基-7-甲氧基異黃 CAS 8257-2-2 訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

淡豆豉對(duì)照藥材 CAS  訂購|咨詢  規(guī)格： g

重樓皂苷 I CAS  訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

薄荷醇 CAS 226-5-5 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

桂酸 CAS 40-0-3 訂購|咨詢  規(guī)格： 00mg

仙鶴草酚B CAS  訂購|咨詢  規(guī)格： 0mg

a-乳糖;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 CAS 5989-8- 訂購|咨詢  規(guī)格： 0.25g

丹參IIA CAS 568-72-9 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%；20mg/支

鼠尾草酚 CAS 5957-80-2 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

堿;Ephedrine hydr CAS 50-98-6 訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

雜交瘤細(xì)胞；GPC3-7C8說明書EGFRvIII  表皮生因子受體III型突變體抗體 規(guī)格: 0.mlGLUT2  葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體 規(guī)格: 0.ml

Phospho-BRCA(Ser524)  磷酸化易感基因抗體 規(guī)格: 0.ml

phospho-Myosin light chain(Ser20)  磷酸化肌球蛋白輕鏈抗體 規(guī)格: 0.ml

EID3  EA樣分化抑制因子3抗體 規(guī)格: 0.2ml

GDF-  生、分化因子抗體 規(guī)格: 0.ml

Integrin alpha 2b/CD4  小板膜糖蛋白ⅡbⅢa抗體 規(guī)格: 0.mlCA3  碳酸酐酶 規(guī)格: 0.2ml

phospho-M-CSF Receptor(Tyr708)  磷酸化巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體抗體 規(guī)格: 0.mlEIF2AK2/PKR  蛋白激酶R抗體 規(guī)格: 0.ml

VHR/DUSP3  /特定蛋酸酶抗體 規(guī)格: 0.2mlCMKLR  趨化樣因子受體抗體 規(guī)格: 0.ml

CYP39A  24α7羥化酶抗體 規(guī)格: 0.2ml

Donkey Anti-human IgG/Cy7  Cy7標(biāo)記的驢抗人IgG 規(guī)格: 0.ml

Oncostatin M  基因蛋白抑瘤素M抗體 規(guī)格: 0.2ml

操作流程：
. 雜交瘤細(xì)胞；GPC3-7C8說明書主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-43），co2孵箱（日本yamato it-6）。
.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
.2. 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～0倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以×05/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液次，細(xì)胞長至60%～70%融合時(shí)，用0.25%消化～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用0×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×04。
.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生的細(xì)胞，以0.25％消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于2個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×00％，計(jì)算貼壁率。 
.6 生長曲線 取指數(shù)生的細(xì)胞用消化制成單細(xì)胞懸液，以×04/孔接種于24孔板，每孔加入ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)0d，繪制細(xì)胞生長曲線