小鼠肺泡巨噬細胞培養(yǎng)試劑盒說明書

小鼠肺泡巨噬細胞培養(yǎng)試劑盒【Mouse Alveolar PrimaCell: Normal Alveolar Macrophages】
  小鼠肺泡巨噬細胞培養(yǎng)試劑盒說明書巨噬細胞屬免疫細胞，有多種功能，是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對象。巨噬細胞容易獲得，便于培養(yǎng)，并可進行純化。巨噬細胞屬不繁殖細胞群，在條件適宜下可生活2－3周，多用做原代培養(yǎng)，難以生存。 利用本公司試劑盒中提供的組織分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的組織能使得細胞一些功能特性發(fā)生改變，從而將平滑肌細胞分離開來。

本試劑盒適用于分離培養(yǎng)小鼠肺泡巨噬細胞。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個細胞的效率是已出版文獻中所報道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養(yǎng)的巨噬細胞中成纖維細胞的含量。 小鼠肺泡巨噬細胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)小鼠的肺泡巨噬細胞。本試劑盒包含： （）OptiTDSTM小鼠肺泡巨噬細胞組織解離液（3×ml） （2）小鼠肺泡巨噬細胞組織處理緩沖液（00ml） （3）FibrOutTM小鼠肺泡巨噬細胞成纖維抑制劑（ml（500X）） （4）小鼠肺泡巨噬組織洗液（5 x 00 ml） （5）小鼠肺泡巨噬細胞生長因子（ml500X）及血清（5x0ml） （6）小鼠肺泡巨噬細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基（5 x 00ml） （7）小鼠肺泡巨噬組織預(yù)備液（ x 00 ml） （8）小鼠肺泡巨噬細胞培養(yǎng)試劑盒使用說明書

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注意事項：
. 接收到小鼠肺泡巨噬細胞培養(yǎng)試劑盒說明書，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

培養(yǎng)步驟：
小鼠肺泡巨噬細胞培養(yǎng)試劑盒說明書對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。?

根瘤菌 Rhizobium sp.

C4-2(人前列腺細胞)5×06cells/瓶×2

地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

SW626(人卵巢細胞)5×06cells/瓶×2

植物桿菌 Lactobacillus plantarum

松杉暗孔菌 Phaeolus schweinitzii

人心房肌細胞*培養(yǎng)基00mL

QBC-939, 人膽管細胞 Human

地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

小鼠肺泡巨噬細胞培養(yǎng)試劑盒說明書鄰二硝分子式：68.英文名稱：Two nitrobenzene：528-29-0分子量： C6H4N2O4

乙二乙英文名稱：Ethylene glycol ether分子式：90.2分子量： C4H0O2：0-80-5

鄰硝對甲砜氯分子式：235.64英文名稱：Ortho para nitro group：3565分子量： C7H6ClNO4S

--3-甲-5-吡唑分子式：73英文名稱：- phenyl -3- methyl -5-：3-8-6分子量： C0HN3

2-啉分子式：63.6英文名稱：2- chloride：62-62-4分子量： C9H6ClN

5-溴-8-硝異喹啉分子式：253.06英文名稱：5- -8- nitro group：63927-23-分子量： C9H5BrN2O2

2,3,5,6-四氟吡分子式：5.06英文名稱：2,3,5,6- Pyridines：2875-8-5分子量： C5HF4N

英文名稱：Up to that分子式：337.46分子量： C22H27NO2：7230-88-5

柴胡皂苷D英文名稱：Radix D分子式：780.98分子量：C42H68O3：20874-52-6

性媒介綠GS英文名稱：Acid medium green GS分子式：46.38分子量： C20H3N2NaO5S：6408-78-2