小鼠膀胱平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說(shuō)明書

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小鼠膀胱平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒【Mouse Bladder PrimaCell: Normal Bladder Smooth Muscle Cells】
     小鼠膀胱平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說(shuō)明書膀胱是一個(gè)儲(chǔ)尿器官。在哺乳類，它是由平滑肌組成的一個(gè)囊形結(jié)構(gòu)，位于骨盆內(nèi)，其后端開口與尿道相通。膀胱與尿道的交界處有括約肌，可以控制尿液的排出其中，小鼠膀胱平滑肌細(xì)胞分離自正常小鼠膀胱平滑肌組織。膀胱是由平滑肌細(xì)胞組成的中空器官。人膀胱平滑肌細(xì)胞傳0代以上仍可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。 雖然膀胱平滑肌組織機(jī)械韌性很強(qiáng)，但利用本公司試劑盒中提供的膀胱平滑肌組織分離體系來(lái)分離，EDTA/EGTA處理過(guò)的薄的平滑肌組織片能使得膀胱平滑肌組織中細(xì)胞的一些功能特性發(fā)生改變，從而將膀胱平滑肌細(xì)胞分離開來(lái)。

本試劑盒適用于分離培養(yǎng)小鼠膀胱平滑肌細(xì)胞。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個(gè)細(xì)胞的效率是已出版文獻(xiàn)中所報(bào)道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細(xì)胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養(yǎng)的膀胱平滑肌原代細(xì)胞中成纖維細(xì)胞的含量。 小鼠膀胱平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)小鼠的膀胱平滑肌細(xì)胞。本試劑盒包含： （）OptiTDSTM小鼠膀胱平滑肌細(xì)胞組織解離液(3×ml) （2）小鼠膀胱平滑肌細(xì)胞組織處理緩沖液 (00ml) （3）FibrOutTM小鼠膀胱平滑肌細(xì)胞成纖維抑制劑 (ml（500x）) （4）小鼠膀胱平滑肌細(xì)胞組織洗液(5 x 00 ml) （5）小鼠膀胱平滑肌細(xì)胞生長(zhǎng)因子（ml500x）及血清（5x0ml） （6）小鼠膀胱平滑肌細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基(5 x 00ml) （7）小鼠膀胱平滑肌細(xì)胞組織預(yù)備液 ( x 00 ml) （8）小鼠膀胱平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒使用說(shuō)明書
培養(yǎng)步驟：
小鼠膀胱平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說(shuō)明書對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。?

小鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基花臉蘑 Lepista sordida

熱帶假絲酵母 Candida tropicalisSV-HUC-(人膀胱上皮永生化細(xì)胞)

毛木耳 Auricularia polytricha植物桿菌 Lactobacillus plantarum

人腎管狀上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基人胃粘膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基

COLO 320DM(人結(jié)直腸腺細(xì)胞)kasumi-, 人白血病細(xì)胞株

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

金直絲鏈霉菌 Streptomyces aureorectus大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

人胚腎細(xì)胞C6(大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞)

mRTEC, 小鼠腎小管上皮細(xì)胞爪哇根霉 Rhizopus javanicus

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae假單胞菌 Pseudomonas sp.

小鼠膀胱平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說(shuō)明書庚醛英文名稱：Enanthaldehyde分子式：4.8分子量： C7H4O：-7-7

4-反-乙環(huán)己溴分子式：267.208英文名稱：4- anti - ethyl cyclohexyl bromide：9538-82-8分子量： C4H9Br

8-溴-4-氯-2-甲喹啉分子式：256.53英文名稱：8- -4- chloride -2-：20-07-6分子量： C0H7BrClN

2-甲氧-3-硝-4-吡甲醛分子式：82.3英文名稱：2-, -3-, -4-, P, P：22349-76-4分子量： C7H6N2O4

三氟甲分子式：46.英文名稱：Three fluorine toluene：3605分子量： C7H5F3

3-羥-2,4,6-*（HTBA）英文名稱：3- hydroxy -2,4,6- three iodo benzoic acid (HTBA)分子式：55.8分子量： C7H3I3O3：53279-72-4

亮綠SF淡黃英文名稱：Light green SF分子式：792.85分子量： C37H34N2O9S3Na2：54-20-8

固藍(lán)B英文名稱：Solid blue B分子式：475.47分子量： C4H2CI2N4O2#：4263-94-6

N-(2-乙酰胺)-2-亞二乙(ADA)英文名稱：N- (2-) -2- two acetic acid (ADA)分子式：90.5分子量： C6H0N2O5：26239-55-4

N-(乙酰)-2-乙烷磺(ACES)英文名稱：N- (acetaminophen) -2- amino acid (ACES)分子式：82.9分子量： C4H0N2O4S：7365-82-4

注意事項(xiàng)：
. 接收到小鼠膀胱平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說(shuō)明書，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。