小鼠前列腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說(shuō)明書(shū)

小鼠前列腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒【Mouse Bone PrimacellTM：Osteblasts】
  小鼠前列腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說(shuō)明書(shū)前列腺（英文：prostate) 是雄性*的性腺器官。前列腺如栗子，底朝上，與膀胱相貼，尖朝下，抵泌尿生殖膈，前面貼恥骨聯(lián)合，后面依直腸，所以有前列腺腫大時(shí)，可做直腸指診，觸知前列腺的背面。其中，小鼠前列腺上皮細(xì)胞傳5代以上仍可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。 雖然前列腺上皮組織機(jī)械韌性很強(qiáng)，但利用本公司試劑盒中提供的前列腺上皮組織分離體系來(lái)分離，EDTA/EGTA處理過(guò)的前列腺上皮組織能使得前列腺上皮細(xì)胞的一些功能特性發(fā)生改變，從而將前列腺上皮細(xì)胞分離開(kāi)來(lái)。

本試劑盒適用于分離培養(yǎng)小鼠前列腺上皮細(xì)胞。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個(gè)細(xì)胞的效率是已出版文獻(xiàn)中所報(bào)道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細(xì)胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養(yǎng)的前列腺上皮原代細(xì)胞中成纖維細(xì)胞的含量。 小鼠前列腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)小鼠的前列腺上皮細(xì)胞。本試劑盒包含： （）OptiTDSTM小鼠前列腺上皮細(xì)胞組織解離液(3×ml) （2）小鼠前列腺上皮細(xì)胞組織處理緩沖液（00ml） （3）FibrOutTM小鼠前列腺上皮細(xì)胞成纖維抑制劑 ml（500x） （4）小鼠前列腺上皮組織洗液(5 x 00 ml) （5）小鼠前列腺上皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子（ml500x）及血清（5x0ml） （6）小鼠前列腺上皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基(5 x 00ml) （7）小鼠前列腺上皮組織預(yù)備液 ( x 00 ml) （8）小鼠前列腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

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注意事項(xiàng)：
. 接收到小鼠前列腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說(shuō)明書(shū)，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

培養(yǎng)步驟：
小鼠前列腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說(shuō)明書(shū)對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。?

考馬斯亮藍(lán)R-250釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

新月彎孢霉 Curvularia lunata根瘤菌

人參刺盤(pán)孢 Colletotrichum panacicolaSNU-5(人胃細(xì)胞)

mCF, 小鼠心臟成纖維細(xì)胞大鼠腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基

野生鏈球菌 Streptococcus ferus左旋酸芽孢桿菌 Bacillus laevolacticus

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

IR983F(大鼠骨髓瘤細(xì)胞)MCF-7(人腺細(xì)胞)

瑞士桿菌 Lactobacillus helveticus嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus

紫色直絲鏈霉菌 Streptomyces violaceorectus糙皮側(cè)耳 Pleurotus ostreatus

大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞*培養(yǎng)基小鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基

小鼠前列腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說(shuō)明書(shū)2,6-二羥萘分子式：60.7英文名稱：2,6- two hydroxy naphthalene：58-43-分子量： C0H8O2

,4-二(2-甲乙)分子式：30.44英文名稱：,4- two (2- methyl styrene group) benzene：3280-6-0分子量： C24H22

2--3-三氟甲吡分子式：62.英文名稱：2- -3- three：8360-70-0分子量： C6H5F3N2

,7-二羥萘分子式：60.7英文名稱：,7- two hydroxy naphthalene：575-38-2分子量： C0H8O2

5-(2-氯)H-四唑分子式：80.59英文名稱：5 -（2 -氯）H四唑：50907-46-5分子量： C7H5ClN4

次百部堿英文名稱：Sub base分子式：35.44分子量：C9H29NO5：

4-聯(lián)分子式：280.英文名稱：4- iodine：59-3-7分子量： C2H9I

二甲粉橙英文名稱：Two a powder orange分子式：分子量：：

2,5-雙十二烷-,4-二--丙炔分子式：490.85英文名稱：2,5- -,4- two -- didodecyl propargyl benzene：29628-0-0分子量： C36H58

4,8-二氯-2-三氯甲喹啉分子式：35.4英文名稱：4,8- two -2- three：93600-66-9分子量： C0H4Cl5N