小鼠肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說(shuō)明書(shū)

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小鼠肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒【Mouse Lung PrimacellTM：NormalArtery Smooth Muscle Cells】
     小鼠肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說(shuō)明書(shū)小鼠肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞分離自正常小鼠肺動(dòng)脈組織，細(xì)胞呈梭形或多角形。該細(xì)胞所表達(dá)的鈣通道表面表達(dá)的ICAM-和VCAM-，參與血管壁炎癥反應(yīng)。該細(xì)胞也是多數(shù)重要?jiǎng)用}疾病的靶細(xì)胞。 雖然肺大動(dòng)脈組織機(jī)械韌性很強(qiáng)，但利用本公司試劑盒中提供的肺大動(dòng)脈組織分離體系來(lái)分離，EDTA/EGTA處理過(guò)的薄的肺大動(dòng)脈組織片能使得肺大動(dòng)脈組織中成肺大動(dòng)脈細(xì)胞的一些功能特性發(fā)生改變，從而將成肺大動(dòng)脈細(xì)胞分離開(kāi)來(lái)。

本試劑盒適用于分離培養(yǎng)新生兒或成年人的成肺大動(dòng)脈細(xì)胞。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個(gè)細(xì)胞的效率是已出版文獻(xiàn)中所報(bào)道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細(xì)胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養(yǎng)的成肺大動(dòng)脈原代細(xì)胞中成纖維細(xì)胞的含量。 小鼠肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)肺大動(dòng)脈組織細(xì)胞。本試劑盒包含： （）OptiTDSTM小鼠肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞組織解離液（3×ml） （2）小鼠肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞組織處理緩沖液（00ml） （3）FibrOutTM小鼠肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞成纖維抑制劑（ml（500x）） （4）小鼠肺大動(dòng)脈平滑肌組織洗液（5x00 ml） （5）小鼠肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞生長(zhǎng)因子（ml 500x）及血清（5x0ml） （6）小鼠肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基（5 x00ml） （7）小鼠肺大動(dòng)脈平滑肌組織預(yù)備液（ x00 ml） （8）小鼠肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
培養(yǎng)步驟：
小鼠肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說(shuō)明書(shū)對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。?

赭綠青霉 Penicillium ochrochloronUM-UC-3, 人膀胱移行細(xì)胞

根瘤菌 Rhizobium sp.紅曲霉 Monascus anka

PATU8988(人胰腺細(xì)胞)人睪支持細(xì)胞*培養(yǎng)基

雙孢蘑菇 Agaricus bisporus鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus

胰凝蛋白酶(含0mL酶解緩沖液)蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis

小鼠腸粘膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基SW 780(人膀胱移行細(xì)胞)

植物桿菌 Lactobacillus plantarum溝腸桿菌 Enterobacter cloacae

費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii異旋孢腔菌 Cochliobolus heterostrophus

mRTEC, 小鼠腎小管上皮細(xì)胞結(jié)腸

少根根霉 Rhizopus arrhizus人腦血管平滑肌細(xì)胞

小鼠肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說(shuō)明書(shū)3-氯-4-硝三氟甲分子式：225.55英文名稱(chēng)：3- -4- nitro three：402--9分子量： C7H3ClF3NO2

6-溴-2-乙酰吡分子式：200.03英文名稱(chēng)：6- -2- acetyl pyridine：49669-3-8分子量： C7H6BrNO

2-溴-5-氟甲分子式：89.02英文名稱(chēng)：2- -5- fluoride：452-63-分子量： C7H6BrF

2--5-巰-,3,4-噻二唑分子式：33.2英文名稱(chēng)：2- amino -5- -,3,4- two：2349-67-9分子量： C2H3N3S2

4,4''-二對(duì)三聯(lián)分子式：482.英文名稱(chēng)：4,4''- two iodine to three：9053-4-6分子量： C8H2I2

3-(2,5-二甲氧)-H-吡唑分子式：英文名稱(chēng)：3- (2,5- two) -H-：822-45-2分子量： CH2N2O2

梔子甙英文名稱(chēng)：Gardenia分子式：388.37分子量：C7H24O0：2452-63-8

7-羥喹啉分子式：45.6英文名稱(chēng)：7- hydroxy group：580-20-分子量： C9H7NO

2-巰-6-甲并惡唑分子式：65.2英文名稱(chēng)：2- mercapto -6- methyl benzoxazole：22876-22-8分子量： C8H7NOS

,3,5-三(三氟甲)分子式：282.英文名稱(chēng)：,3,5- three (three f) benzene：729-8-7分子量： C9H3F9

注意事項(xiàng)：
. 接收到小鼠肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說(shuō)明書(shū)，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。