大鼠腦膜成纖維細胞培養(yǎng)

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大鼠腦膜成纖維細胞【RatBrain:NormalBrainMeningeal Fibroblasts】
     大鼠腦膜成纖維細胞培養(yǎng) 產(chǎn)品描述：大鼠腦膜成纖維細胞是結(jié)締組織中常見的一種細胞，主要功能是在組織創(chuàng)傷后修復組織。公司提供的大鼠腦膜成纖維細胞，采用膠原酶消化制備而來。細胞的培養(yǎng)采用公司產(chǎn)品大鼠腦膜成纖維細胞培養(yǎng)試劑盒(RatBrainPrimaCell?:NormalBrainMeningealFibroblastsCatNo.3-7477)來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞（如脂肪細胞等）的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標準的操作流程下，大鼠腦膜成纖維細胞可以保持原代細胞的分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。公司提供的細胞有標準的鑒定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、公司售后服務標準。
      保存和應用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應用。
培養(yǎng)步驟：
大鼠腦膜成纖維細胞培養(yǎng)對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。?

MN-s, 小鼠紋狀體神經(jīng)元人神經(jīng)小膠質(zhì)細胞*培養(yǎng)基

酒假絲酵母 Candida kefyr泡盛曲霉 Aspergillus awamori

豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum園弧青霉

地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformisGH3, 大鼠垂體生激素腺瘤

白色小莢孢囊菌 Microellobospora candidus釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

人低分化前胃細胞香菇 Lentinula edodes

葡枝根霉 Rhizopus stoloniferCaco-2，人結(jié)直腸腺細胞

貝葉多孔菌釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

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大鼠腦膜成纖維細胞培養(yǎng)3--2-氯-6-三氟甲吡分子式：96.56英文名稱：3- amino -2- -6- three：759-09-2分子量： C6H4ClF3N2

3,4-二氯硝分子式：92英文名稱：3,4- two：99-54-7分子量： C6H3Cl2NO2

3,4二氟芐氨分子式：388.英文名稱：3,4 two f：7788-94-2分子量： C8H2Br2

亞磷酸二氫鉀(晶體)分子式：20.09英文名稱：Potassium dihydrogen phosphite (crystal)：3977-65-6分子量： H2KO3P

3-羥分子式：0.5英文名稱：3- piperidine：6859-99-0分子量： C5HNO

2-氯-5-溴吡分子式：92.44英文名稱：2- -5- bromide：53939-30-3分子量： C5H3BrClN

2-溴-6-羧吡分子式：202.0英文名稱：2- -6- group：290-87-4分子量： C6H4BrNO2

間三氟甲氯芐分子式：94.58英文名稱：Between three f：705-29-3分子量： C8H6ClF3

2,4-二甲-5-乙酰噻唑分子式：55.22英文名稱：2,4-二甲- 5 -乙酰噻唑：38205-60-6分子量： C7H9NOS

5-甲-2-乙酰呋喃分子式：24.4英文名稱：5- methyl -2- acetyl：93-79-9分子量： C7H8O2

注意事項：
. 接收到大鼠腦膜成纖維細胞培養(yǎng)，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。