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    小鼠葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(GRP78)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格

    小鼠葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(GRP78)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格

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    小鼠葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(GRP78)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格 詳細資料

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    產(chǎn)品名稱:小鼠葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(GRP78)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格
    英文名稱: GRP78 Elisa kit
    規(guī)格:96T/48T
    存儲條件:2-8℃
    有效期:6個月
    特異性:本ELISA檢測試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關蛋白無交叉反應。
    檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
    適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床 。

    小鼠葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(GRP78)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格類型和操作步驟
    ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑:
    ①固相的抗原或抗體,
    ②酶標記的抗原或抗體,
    ③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來源和標本的性狀以及檢測的具備條件,可設計出各種不同類型的檢測方法。
    (一)雙抗體夾心法、
    (二)一步法、
    (三)間接法測抗體、
    (四)競爭法。
    小鼠葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(GRP78)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格標本要求
    .標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
    2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
    操作步驟
    .標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可向客服索取說明書》》 在線索取
    2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品0μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
    3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
    4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
    5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
    6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
    7.溫育:操作同3。
    8.洗滌:操作同5。
    9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘。
    0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
    . 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后5分鐘以內(nèi)進行。
    小鼠葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(GRP78)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格技術流程:
    一、雙抗體夾心法(檢測未知抗原)
    、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應孔中加0.ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
    2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
    3、加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小時,洗滌。
    4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
    5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
    6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。
    二、間接法(檢測未知抗體)
    、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
    2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
    3、加酶標抗體:于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
    4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
    5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
    6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。

    IL6ST    重組人 IL6ST / gp30 / CD30 蛋白 (His & Fc 標簽)    IL6ST
    VWF    重組人 vWF 蛋白 (His 標簽)    VWF
    IL3RA    重組人 IL3RA 蛋白 (His & Fc 標簽)    IL3RA
    GDF5    重組人 GDF-5 蛋白 (Fc 標簽)    GDF5
    CCL5    重組人 CCL5 / RANTES 蛋白 (His & mucin 標簽)    CCL5
    CD200    重組人 CD200 / OX-2 蛋白 (His 標簽)    CD200
    ENPP7    重組人 ENPP7 / NPP-7 蛋白 (His 標簽)    ENPP7
    CEACAM    重組人 CEACAM / CD66a (Fc Chimera) 蛋白 (His & Fc 標簽)    CEACAM
    FLT4    重組人 VEGFR3 / FLT4 蛋白 (Fc 標簽)    FLT4
    CD70    重組人 CD70 / CD27L / TNFSF7 蛋白 (Fc 標簽)    CD70
    EPHB2    重組人 EphB2 蛋白 (His 標簽)    EPHB2
    MICB    重組人 MICB 蛋白 (His 標簽)    MICB
    CSF2RA    重組人 CSF2RA / GM-CSFR / CD6 蛋白 (His 標簽)    CSF2RA多聚甲醛    25g    
    真細菌種屬鑒定 PCR Mix 2    00 次    
    CAS83382-89-2    QAE 葡聚糖凝膠 A-50    25g
    30566-000    α-Actin 小鼠單抗    000μL
    80403-    RNase-free 水    mL
    P- 硝基苯基磷酸    00mg    
    cDNA 克隆系列    5 μg    
    DNA 電泳分子量標準 200-500 bp)    50 次    
    磁珠植物 DNAout    50 次    
    小鼠葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(GRP78)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格D020-    PCR- 單鏈構象多態(tài)性檢測技術服務    一塊膠
    8070-0    TG 化學感受態(tài)細胞    0.mL×0
    小鼠抗 His 標簽單抗    000μL    
    即用型長片段 PCR 試劑盒    20 次    
    N- 乙酰 -D- 氨基葡萄糖    5g    
    HinfI     2000U    
    Oligo dT2-8 引物,0.5μg/μL    5μg    
    23-030-5    Carboxy-PTIO( 一氧化氮清除劑 )    5mg

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