小鼠熱休克蛋白70（HSP-70）酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格

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產(chǎn)品名稱：小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格
英文名稱： Hsp-70 ELISA Kit

規(guī)格：96T/48T
存儲條件：2-8℃
有效期：6個月
特異性:本ELISA檢測試劑盒可同時檢測天然或重組的，且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。
檢測種屬：人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍：此試劑盒僅用于科研實驗，禁用于臨床 。

小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格類型和操作步驟
ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑：
①固相的抗原或抗體，
②酶標記的抗原或抗體，
③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來源和標本的性狀以及檢測的具備條件，可設(shè)計出各種不同類型的檢測方法。
（一）雙抗體夾心法、
（二）一步法、
（三）間接法測抗體、
（四）競爭法。
小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格標本要求
．標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可向客服索取說明書》》 在線索取
2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品0μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7.溫育：操作同3。
8.洗滌：操作同5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后5分鐘以內(nèi)進行。
小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格技術(shù)流程:
一、雙抗體夾心法(檢測未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育小時。然后洗滌(同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～小時，洗滌。
4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml，37℃ 0～30分鐘。
5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則40nm)處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍，即為陽性。
二、間接法(檢測未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml， 每孔加0.ml，4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標抗體：于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.05ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml，37℃ 0～30分鐘。
5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則40nm)處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍，即為陽性。

HL    重組人 CHL- 蛋白 (His 標簽)    CHL
B2M    重組人 B2M / Beta-2-microglobulin 蛋白 (His 標簽)    B2M
CSH    重組人 Placental Lactogen / CSH 蛋白 (His 標簽)    CSH
CD97    重組人 CD97 蛋白 (Fc 標簽)    CD97
LILRB3    重組人 LILRB3 / LIR3 / ILT5 / CD85a 蛋白 (His 標簽)    LILRB3
LUM    重組人 Lumican / LUM 蛋白 (His 標簽)    LUM
LCN    重組人 LCN / VEGP / Lipocalin- 蛋白 (His 標簽)    LCN
MANF    重組人 MANF / ARMET 蛋白 (His 標簽)    MANF
CDH5    重組人 VE-Cadherin / CD44 / CDH5 蛋白 (His & Fc 標簽)    CDH5
CRTAM    重組人 CRTAM 蛋白 (His 標簽)    CRTAM
LRP    重組人 LRP / A2MR / CD9 蛋白 (aa 786-65)    LRP
ICOSLG    重組人 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 蛋白 (His 標簽)    ICOSLG
FCRL    重組人 FCRL / FCRH 蛋白 (His 標簽)    FCRL
ANGPT2    重組人 ANG2 / Angiopoietin-2 蛋白 (His 標簽)    ANGPT2
METTL    重組人 METTL 蛋白 (His 標簽)    METTL326-20    一站式平末端克隆試劑盒    20 次
一站式 RNA 電泳套裝    0 次    
克必隆 RACE 試劑盒    0 次    
鮭魚精 DNA    00mg    
小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格動物上皮細胞生長因子    5mL 
DNA  2-Mercaptoethanol(2- 乙醇 )    50mL    
40629-5    0雙染細胞凋亡檢測試劑盒（Annexin V- 熒光素 555·7-AAD）    50 次

20654D-20    Southern Marker DL2000(DIG)    20 次
石蠟包埋組織全基因組擴增試劑盒    30 次    
動物細胞核蛋白微量制備試劑盒    00 次    
    g    
    250mg    
CAS779-8-6    氯化鎂六水    00g
30533-0    木瓜蛋白酶抑制劑溶液，0.5 mg/mL    0mL
柱式尿液 DNAout    50 次