豬脂蛋白脂酶（LPL）酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存

豬脂蛋白脂酶(LPL)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存標(biāo)本要求
．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可向客服索取說明書》》 在線索取
2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品0μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7.溫育：操作同3。
8.洗滌：操作同5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后5分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

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產(chǎn)品名稱：豬脂蛋白脂酶(LPL)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存
英文名稱： LPL ELISA kit
規(guī)格：96T/48T
存儲(chǔ)條件：2-8℃
有效期：6個(gè)月
特異性:本ELISA檢測(cè)試劑盒可同時(shí)檢測(cè)天然或重組的，且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。
檢測(cè)種屬：人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測(cè)試劑盒等種屬。
適用范圍：此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn)，禁用于臨床 。

豬脂蛋白脂酶(LPL)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存類型和操作步驟
ELISA可用于測(cè)定抗原，也可用于測(cè)定抗體。在這種測(cè)定方法中有3種必要的試劑：
①固相的抗原或抗體，
②酶標(biāo)記的抗原或抗體，
③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的性狀以及檢測(cè)的具備條件，可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測(cè)方法。
（一）雙抗體夾心法、
（二）一步法、
（三）間接法測(cè)抗體、
（四）競(jìng)爭(zhēng)法。
豬脂蛋白脂酶(LPL)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存技術(shù)流程:
一、雙抗體夾心法(檢測(cè)未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔)。
3、加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～小時(shí)，洗滌。
4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.ml，37℃ 0～30分鐘。
5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則40nm)處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.倍，即為陽性。
二、間接法(檢測(cè)未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml， 每孔加0.ml，4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對(duì)照)
3、加酶標(biāo)抗體：于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.05ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.ml，37℃ 0～30分鐘。
5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則40nm)處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.倍，即為陽性。

MVK    重組人 PMVK / phosphomevalonate kinase 蛋白 (His 標(biāo)簽)    FastDigest® AfeI (Eco47III)
DCTPP    重組人 XTP3TPA / DCTPP 蛋白 (His 標(biāo)簽)    FastDigest® EagI (Eco52I)
PPCDC    重組人 PPC-DC / PPCDC 蛋白 (His 標(biāo)簽)    FastDigest® AcuI (Eco57I)
VSNL    重組人 VILIP- / VSNL 蛋白    FastDigest® PmlI (Eco72I)
COMMD9    重組人 COMMD9 蛋白 (His 標(biāo)簽)    FastDigest® Bsu36I (Eco8I)
CBFB    重組人 CBFB / CBF-beta 蛋白 (His 標(biāo)簽)    FastDigest® AvaI (Eco88I)
GCSH    重組人 GCSH 蛋白 (His 標(biāo)簽)    FastDigest® Eco9I
PAX8    重組人 PAX8 蛋白 (His 標(biāo)簽)    FastDigest® SnaBI (Eco05I)
OPTN    重組人 Optineurin / OPTN 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)    FastDigest® StyI (Eco30I)
ARL2BP    重組人 ARL2BP / BART 蛋白 (His 標(biāo)簽)    FastDigest® StuI (Eco47I)
CARHSP    重組人 CARHSP 蛋白 (His 標(biāo)簽)    FastDigest® ScaI
ING4    重組人 ING4 蛋白 (His 標(biāo)簽)    FastDigest® EheI人淋巴細(xì)胞分離液 .077(FICOLL 配置 )     200mL    
8-0330-250    過氧化氫定量分析試劑盒 ( 脂兼容性 )    250 T
002-250    TAE 電泳液 ,50×    250mL
傘形酮    5g    
DNA  CTAB 溶液，20%    00mL    
柱式 OLIGO 回收試劑盒    50 次    
Rosetta-gami B(DE3)plysS 菌種    mL    
362-600    WarmStart Bst DNA 聚合酶    600U
00879-    電泳過硫酸銨    0.gx0
豬脂蛋白脂酶(LPL)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存T3 RNA 聚合酶    0000U    
彈性蛋白酶 ( 豬胰 )    25mg    
微量蛋白沉淀試劑盒    50 次    
小鼠抗 HA 標(biāo)簽單抗    00μL    
809-.5    蛋白酶 K 溶液，0mg/mL    .5mL
5208C-5     dNTP 溶液，00mM     5mL
甜菜堿溶液，5M，PCR     .5mL