ELISA常用方法對比

我們知道，ELISA可分為多種類型測定，是一種廣泛應用在測定液體樣本中的蛋白、抗體、或激素的免疫分析技術。 我公司技術部將各種ELISA常用方法的優勢劣勢進行對比，結果如下：

一、間接法：此測定方法與直接法類似，差別在于一級抗體沒有酶標記，改用酶標記的二級抗體去辨識一級抗體來測定抗原量。

優勢：二抗可以加強信號，而且有多種選擇能做不同的測定分析。不加酶標記的一級抗體則能保留它zui多的免疫反應性。

劣勢：交互反應發生的機率較高。

二、雙抗體夾心法：被檢測的抗原包被在兩個抗體之間，其中一個抗體將抗原固定于固相載體上，即捕捉抗體。另一個則是檢測抗體，此抗體可用酶標記后直接測定抗原的量；或不標記，再透過酶標記的二級抗體來測定抗原的量。這兩種抗體必須小心選取，才可避免交互反應或競爭相同的抗原結合部位。

優勢：高靈敏、高專一性，抗原無須事先純化。

劣勢：抗原一定得擁有兩個以上的抗體結合部位。

三、直接法：將抗原直接固定在固相載體上，加入酶標記的一級抗體，即可測定抗原總量，此一級抗體的特異性非常重要。

優勢：操作手續簡短，因無須使用二抗可避免交互反應。

劣勢：試驗中的一抗都得用酶標記，但不是每種抗體都適合做標記，費用相對提高。